您现在的位置:大唐娱乐彩票_皇冠彩票网_永利彩票网_云鼎彩票网_皇家彩票 > 购彩大厅 > 北京pk10五码二期必中技巧

北京pk10五码二期必中技巧

2018-09-20 05:05

  文库君已有近万本图书,还会不竭采集精品免费内容双手送上,请及时续费哦!

  暂无评价0人阅读0次下载举报文档

  超氧化物歧化酶活性的测定_化学_天然科学_专业材料。动物组织中超氧化物歧化酶和平测定方式 【尝试目标】 1. 领会还原法测定抗氧化酶活性测定的道理方式。 2. 熟悉动物叶片中 ROS 去除机制。 【尝试道理】 超氧化物歧化酶(SOD)遍及具有于动动物与

  动物组织中超氧化物歧化酶和平测定方式 【尝试目标】 1. 领会还原法测定抗氧化酶活性测定的道理方式。 2. 熟悉动物叶片中 ROS 去除机制。 【尝试道理】 超氧化物歧化酶(SOD)遍及具有于动动物与微生物体内。SOD 是含金属辅基的酶。高 等动物有两品种型的 SOD : Mn-SOD 和 Cu/Zn-SOD 。 SOD 可以或许断根超氧阴离子自在基 (O2—),它与 CAT、POD 等酶协同感化来防御活性氧或其他过氧化物自在基对细胞膜系统 的危险,从而削减自在基对机体的迫害。 超氧阴离子自在基(O2—)是生物细胞某些心理生化反映常见的两头产品。SOD 能通过 歧化反映断根生物细胞中的超氧阴离子自在基,生成 H2O2 和 O2。生成的 H2O2 可被过氧化氢 酶分化为 O2 和 H2O: 2 O2—+ 2H+ 2 H2O2 CAT SOD H2O2+O2 O2+H2O 超氧自在基很是不不变,寿命极短,一般用间接方式测定 SOD 活性。本尝试根据 SOD 抑止氮蓝四唑(NBT)在光下的还原感化来确定酶活性的大小。有氧化物质具有时,核黄素 可在光照前提下还原。被还原的核黄素在有氧前提下极易再氧化而发生 O2 — 。当插手 NBT 后,在光照前提下 O2—又可将 NBT 还原为蓝色的甲腙,后者在 560nm 处有最大光接收。 当插手 SOD 时,SOD 可通过断根 O2—,而抑止 NBT 的光还原反映,使蓝色甲腙生成速 度减慢。于是,进行光还原反映后,反映液蓝色越深,申明酶的活性越低,反之酶的活性越 高。抑止 NBT 光还原的相对百分率与酶活性在必然范畴内呈正相关关系,据此能够计较出酶 活性的大小。常常将抑止 50%的 NBT 光还原反映时所需的酶量作为一个酶活性单元(U)。 【器材与试剂】 1. 尝试仪器与器具 研钵、高速冷冻离心计心情、分光光度计、微量移液枪、刻度移液管、离心管、光照箱(光 照度为 4000lx)、容量瓶(10ml)、试管 2. 尝试试剂 50mmol/L 磷酸缓冲液(pH7.8); 130mmol/L 甲硫氨酸(MET)溶液; 750μmol/L 氮蓝四唑(NBT)溶液; 100μmol/L EDTA- Na2 溶液; 20μmol/L 核黄素溶液; SOD 提取介质:50mmol/L 磷酸缓冲液(pH7.8)内含 1% PVP 。 3. 尝试材料 一般发展或经顺境处置的小麦叶片 【尝试步调】 1. SOD 提取:称取动物材料 0.5g 于预冷的研钵中,插手 2ml 预冷的提取介质,在冰浴条 件下研磨成匀浆,转移至 10ml 容量瓶中,用提取介质冲刷研钵 2~3 次(每次 1~ 2ml),归并冲刷液于容量瓶中,定容至 10 ml。取 5ml 转入到离心管中,yy彩票注册于 4℃、 10000 r/min 离心 15min,收集上清液,即为 SOD 粗提液。 2.活性测定:取通明度好、质底不异的试管 4 支。测定管 2 支,光下对照 1 支,黑暗对 照 1 支(调零)。按下表所列内容插手各类溶液(留意最初插手核黄素溶液)。 表 测定 SOD 活性时各试剂插手量 测定管 1 50mmol/L 磷酸缓冲液(pH7.8) 130mmol/L MET 溶液 750μmo http://ravenandmartin.com/goucaidating/4451/

推荐笑话段子