您现在的位置:大唐娱乐彩票_皇冠彩票网_永利彩票网_云鼎彩票网_皇家彩票 > 购彩大厅 > 北京赛车是哪个

北京赛车是哪个

2018-09-20 19:35

  就教一下列位高手,有谁在做动物体超氧化物歧化酶活性试验的测定吗?或者哪位有测定方式啊(最好是尺度操作方式)跪求。孔殷盼愿回帖。感谢!前往小木虫查看更多

  超氧化物歧化酶(suPeroXIde dIsMuTAse,简称SOD)是需氧生物中遍及具有的一种含金属酶。它与过氧化物酶、过氧化氢酶等酶协同感化防御活性氧或其他过氧化物自在基对细胞膜系统的危险;超氧化物歧化酶能够催化氧自在基的歧化反映,生成过氧化氢,过氧化氢又能够被过氧化氢酶转化成无害的分子氧和水。

  已知此酶活力与动物抗逆性及衰老有亲近关系,故成为动物顺境心理学的主要研究对象。

  根据超氧化物歧化酶抑止氮蓝四唑(NBT)在光下的还原感化来确定酶活性大小。在有可氧化物存鄙人,核黄素可被光还原,被还原的核黄素在有氧前提下极易再氧化而发生O2,O2可将NBT还原为蓝色的甲,后者在560nM处有最大接收。而超氧化物歧化酶作为氧自在基的断根剂可抑止此反映。于是光还原反映后,反映液蓝色愈深,申明酶活性愈低,反之酶活性愈高。一个酶活单元定义为将NBT的还原抑止到对照一半(50%)时所需的酶量。

  【仪器与器具】

  高速台式离心计心情;分光光度计;微量进样器;荧光灯(反招考管处照度为4000lX);15MM×150MM试管;黑色硬纸套。

  提取介质50MMol/L PH78磷酸缓冲液(内含1%聚乙烯吡咯烷酮);

  100μMol/L核黄素溶液提0.0075g,定容至100Ml,避光保留,随用随配,并稀释10倍。

  1.酶液提取取必然部位的动物叶片(视需要定,去叶脉)0.5g于预冷的研体中,加2Ml预冷的提取介质在冰浴下研磨成匀浆,插手提取介质冲刷研钵,并使终体积为10Ml。取5Ml于4℃下10 000r/Min离心15Min,上清液即为SOD粗提液。

  2.显色反映取通明度、质地不异的15MM×150MM试管4支,2支为测定、2支为对照,按表22-1插手试剂。

  混匀后,给1支对看管罩上比试管稍长的双层黑色硬纸套遮光,与其他各管同时置于4000lx日光灯下反映20~30Min(要求各管照光环境分歧,反映温度节制在25~35℃之间,视酶活性凹凸恰当调整反映时间)。

  3SOD活性测定与计较至反映竣事后,用黑布罩盖上试管,终止反映。以遮光的对看管作为空白,别离在560nM波长下测定各管的吸光度,按式22-1计较SOD活性。

  表22-1显色反招考剂配制表

  SOD比活力=SOD总活性卵白质浓度(22-2)

  式中SOD总活性以每克鲜重酶单元暗示;比活力单元以每毫克卵白酶单元、酶单元/Mg暗示;

  A0:照光对照光管的光接收值;

  AS:样品管的光接收值;

  VT:样液总体积(Ml);

  V1:测按时样品用量(Ml);

  FW:样品鲜重(g);

  卵白质浓度单元为每克鲜重含卵白毫克数(Mg/g)。

  当测定样品数量较大时,可在临用前按照用量将表22-1中各试剂(酶液和核黄素除外)按比例夹杂后一次插手290Ml,然后顺次插手核黄素和酶液,使终浓度不变,其余各步与上相停?/p>

  趁便问哈,方式原出处?不堪感谢感动。

  欠好意义,这段时间没上小木虫,盈佳国际网站

  你参考一下:张治安,张美善,蔚荣海主编的《动物心理学尝试指点》

  中国农业科学手艺出书社(2004版)。p:132.

  用邻苯三酚自氧化速度法测定SOD操 http://ravenandmartin.com/goucaidating/4479/

推荐笑话段子